為了減少非法添加違禁藥物的現(xiàn)象，2013年5月1日，佛山開始試行水產(chǎn)品產(chǎn)地標(biāo)識(shí)準(zhǔn)入制，對(duì)桂花魚、生魚、黃骨魚三種價(jià)格較昂貴的魚類配上“身份證”，即追溯碼，可以查到具體的魚塘，該規(guī)定試行至今3個(gè)月，其中有2個(gè)月查出魚類非法添加了孔雀石綠。根據(jù)佛山市農(nóng)業(yè)局發(fā)布的7月份農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全風(fēng)險(xiǎn)監(jiān)測情況，高明區(qū)的2份草魚樣本查出孔雀石綠殘留。有統(tǒng)計(jì)發(fā)現(xiàn)，2013年以來魚類產(chǎn)品已經(jīng)4次查出孔雀石綠殘留。害魚的孔雀石綠究竟是什么？其有何危害而不能用于水產(chǎn)品？有沒有有力的檢測手段呢？本文將一一解答。
孔雀石綠是什么
孔雀石綠是一種帶有金屬光澤的綠色結(jié)晶體，因顏色與孔雀石相近而得名，又名堿性綠、孔雀綠。其分子式為C23H25ClN2，極易溶于水，水溶液呈蘭綠色。孔雀石綠是一種三苯甲烷類化工染料，以往僅在制陶業(yè)、紡織業(yè)、皮革業(yè)、細(xì)胞化學(xué)染色劑和指示劑等方面有所使用。自1933 年起孔雀石綠開始作為驅(qū)蟲劑、殺菌劑、防腐劑在水產(chǎn)養(yǎng)殖中出現(xiàn)，而后因?yàn)榫哂袃r(jià)格低廉、效果顯著等優(yōu)點(diǎn)，而被廣泛用于活魚運(yùn)輸及各類水產(chǎn)動(dòng)物疾病的預(yù)防和治療。
孔雀石綠
孔雀石綠有何危害
但隨著研究的深入，孔雀石綠潛在的毒副作用受到了關(guān)注。研究發(fā)現(xiàn)，孔雀石綠進(jìn)入水生動(dòng)物體內(nèi)后，會(huì)快速代謝成脂溶性的無色孔雀石綠。孔雀石綠具有潛在的致癌、致畸、致突變的作用，其在養(yǎng)殖業(yè)中的使用未得到美國食品與藥物管理局( FDA ) 的認(rèn)可；根據(jù)歐盟法案2002 /675 /EC的規(guī)定，動(dòng)物源性食品中孔雀石綠和無色孔雀石綠殘留總量限制為2μg/kg；日本的肯定列表也明確規(guī)定在進(jìn)口水產(chǎn)品中不得檢出孔雀石綠殘留；我國在農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)《NY5071- 2002無公害食品魚藥使用準(zhǔn)則》中也將孔雀石綠列為禁用藥物。但由于沒有低廉有效的替代品，孔雀石綠在水產(chǎn)養(yǎng)殖中的使用屢禁不止，這就給監(jiān)管部門的檢測監(jiān)控提出了難題。
孔雀石綠的檢測
如上所述，孔雀石綠在水生動(dòng)物體內(nèi)迅速代謝成物色孔雀石綠，而無色孔雀石綠的毒性甚至超過孔雀石綠，所以我們通常將孔雀石綠和無色孔雀石綠的總量作為動(dòng)物源性食品中孔雀石綠殘留的限量指標(biāo)。目前，孔雀石綠的檢測方法以理化檢測法和免疫學(xué)檢測法為主。其中理化檢測法包括：薄層層析法、分光光度法、 高壓液相色譜法、液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用法、氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用法等。但這些檢測方法步驟繁雜，設(shè)備昂貴，對(duì)操作人員要求要高，不宜普及推廣，相較之下免疫學(xué)檢測方法更為常用。
酶聯(lián)免疫檢測法（ELISA）：酶聯(lián)免疫法的基本原理是將酶分子與抗體分子共價(jià)結(jié)合，結(jié)合產(chǎn)物不會(huì)改變抗體的免疫學(xué)特性，也不影響酶的生物學(xué)活性。此種酶標(biāo)抗體可與吸附在固相載體上的抗原或抗體發(fā)生特異性結(jié)合。底物可在酶的作用下使其所含的供氫體由無色的還原型轉(zhuǎn)變成有色的氧化型，出現(xiàn)顏色反應(yīng)，顏色反應(yīng)的深淺與樣品中相應(yīng)抗體或抗原的量呈一定的比例，顯色反應(yīng)可通過酶標(biāo)儀進(jìn)行定量測定。ELISA方法是一種既特異又敏感的檢測方法，可分為： 間接競爭抑制法、抗體/抗原包被直接競爭法和夾心法。
孔雀石綠的ELISA檢測法采用的是間接競爭抑制法，是用人工抗原包被酶反應(yīng)板后加入抗血清和待測藥物進(jìn)行競爭性結(jié)合反應(yīng)，洗滌后板上只留有與包被抗原結(jié)合的抗體(一抗) ，再加酶標(biāo)記物的二抗與一抗結(jié)合，洗滌后加入酶的底物。酶催化反應(yīng)的產(chǎn)物量與被結(jié)合的一抗和二抗量呈正比，與待測樣品中相應(yīng)的藥物量呈反比。其特點(diǎn)在于一個(gè)一抗可結(jié)合多個(gè)二抗，放大待測物的量，提高了方法的靈敏度。目前商品ELISA孔雀石綠試劑盒，都只能檢測孔雀石綠總量，不能同時(shí)檢測孔雀石綠和無色孔雀石綠各自的含量，在樣品前處理過程中應(yīng)注意根據(jù)抗原和抗體的類型，將目標(biāo)化合物全部轉(zhuǎn)化成相對(duì)應(yīng)的形態(tài)。
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孔雀石綠快速檢測水溶性非食用色素試劑盒檢測速度快，靈敏度高，操作簡單，性價(jià)比高，特別適合大批量樣品的篩選。但需要注意的是：雖然ELISA 法的抗原和抗體結(jié)合有較強(qiáng)的選擇性，但水產(chǎn)品的種類繁多，基質(zhì)復(fù)雜，檢測結(jié)果的假陽性幾率較高。因此，用該方法檢出的陽性樣還需用進(jìn)一步通過高壓液相色譜法或液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用法進(jìn)行定量和確證。
孔雀石綠作為一種化工常用原料，難以禁止其生產(chǎn)；且其價(jià)格低廉、防治某些水產(chǎn)病害效果明顯，對(duì)其進(jìn)行控制有一定的難度。但是孔雀石綠潛在的毒副作用是不容忽視的，我們需要加強(qiáng)對(duì)孔雀石綠的了解，建議養(yǎng)殖從業(yè)者自覺使用較為安全的漁場殺蟲和殺菌劑，加大監(jiān)管力度，盡快研究出孔雀石綠的替代藥物。
本文關(guān)鍵詞：孔雀石綠,孔雀石綠殘留,非法違禁藥
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